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010-82491398

報(bào)告問(wèn)題解答:

010-8646-0567

檢測(cè)領(lǐng)域:

成分分析,配方還原,食品檢測(cè),藥品檢測(cè),化妝品檢測(cè),環(huán)境檢測(cè),性能檢測(cè),耐熱性檢測(cè),安全性能檢測(cè),水質(zhì)檢測(cè),氣體檢測(cè),工業(yè)問(wèn)題診斷,未知成分分析,塑料檢測(cè),橡膠檢測(cè),金屬元素檢測(cè),礦石檢測(cè),有毒有害檢測(cè),土壤檢測(cè),msds報(bào)告編寫(xiě)等。

蛋白質(zhì)印跡定量分析檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2025-07-10

關(guān)鍵詞:蛋白質(zhì)印跡定量分析測(cè)試案例,蛋白質(zhì)印跡定量分析測(cè)試機(jī)構(gòu),蛋白質(zhì)印跡定量分析測(cè)試方法

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來(lái)源:北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所

文章簡(jiǎn)介:

蛋白質(zhì)印跡定量分析檢測(cè)用于精確測(cè)定特定蛋白在復(fù)雜樣本中的表達(dá)量。該技術(shù)通過(guò)電泳分離、膜轉(zhuǎn)移和特異性抗體反應(yīng)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白檢測(cè),核心參數(shù)包括線性范圍、檢測(cè)限和批間精密度,適用于臨床診斷與基礎(chǔ)研究中的蛋白表達(dá)譜分析。
點(diǎn)擊咨詢

因業(yè)務(wù)調(diào)整,部分個(gè)人測(cè)試暫不接受委托,望見(jiàn)諒。

檢測(cè)項(xiàng)目

目標(biāo)蛋白相對(duì)定量:采用內(nèi)參蛋白校正,定量精度達(dá)±5%,線性范圍10pg-1μg

灰度值分析:通過(guò)成像系統(tǒng)測(cè)量條帶光密度,分辨率0.01OD/mm2

分子量校準(zhǔn):使用預(yù)染蛋白Marker,誤差范圍±2kDa

表達(dá)豐度比:計(jì)算靶蛋白/內(nèi)參蛋白比值,重復(fù)性CV≤8%

跨膜效率驗(yàn)證:轉(zhuǎn)印后Ponceau S染色評(píng)估,轉(zhuǎn)移率≥95%

非特異性結(jié)合率:封閉后背景信號(hào)控制,信噪比≥10:1

抗體效價(jià)測(cè)試:確定最佳一抗稀釋度(1:500-1:5000)

化學(xué)發(fā)光動(dòng)力學(xué):ECL底物發(fā)光強(qiáng)度監(jiān)測(cè),動(dòng)態(tài)范圍104倍

條帶線性回歸:校準(zhǔn)曲線R2值≥0.98

批次間差異分析:三批次樣本RSD≤12%

膜上蛋白回收率:Bradford法測(cè)定,回收率85%-115%

磷酸化位點(diǎn)定量:磷酸化抗體檢測(cè),特異性驗(yàn)證≥90%

檢測(cè)范圍

血清生物標(biāo)志物:心肌肌鈣蛋白I定量檢測(cè),檢測(cè)限0.1ng/mL

腫瘤組織裂解液:HER2受體表達(dá)水平分析,樣本量≥20mg

細(xì)胞信號(hào)通路蛋白:MAPK/AKT通路磷酸化狀態(tài)監(jiān)測(cè)

轉(zhuǎn)基因表達(dá)產(chǎn)物:重組蛋白在CHO細(xì)胞中的表達(dá)效率

病原體抗原檢測(cè):病毒衣殼蛋白在感染組織中的分布

神經(jīng)退行標(biāo)志物:腦脊液tau蛋白及Aβ42定量

藥物靶點(diǎn)表達(dá):GPCR受體在膜蛋白組分的豐度

植物脅迫響應(yīng)蛋白:干旱誘導(dǎo)蛋白在葉綠體的表達(dá)

融合蛋白驗(yàn)證:His-tag重組蛋白純度≥90%

凋亡相關(guān)因子:caspase-3活化片段檢測(cè)

細(xì)胞周期調(diào)控蛋白:Cyclin B1在同步化細(xì)胞的表達(dá)

表觀遺傳修飾:組蛋白乙酰化位點(diǎn)定量分析

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

ISO 19001:2018 免疫印跡定量分析通則

ISO 13485:2016 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范

GB/T 35552-2017 蛋白質(zhì)免疫印跡檢測(cè)方法

ASTM E3106-17 印跡膜性能評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)指南

GB/T 27417-2017 合格評(píng)定 化學(xué)分析方法驗(yàn)證通則

YY/T 1579-2018 腫瘤個(gè)體化治療相關(guān)基因突變檢測(cè)試劑盒

CLSI EP05-A3 定量測(cè)量精密度驗(yàn)證方案

GB 4789.40-2016 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 蛋白質(zhì)免疫印跡法

IEC 61010-2-101 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備安全規(guī)范

ISO 15189:2022 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力要求

檢測(cè)儀器

垂直電泳系統(tǒng):配置10-20孔梳齒,電壓范圍50-300V,實(shí)現(xiàn)蛋白按分子量精確分離

半干式轉(zhuǎn)印儀:恒流轉(zhuǎn)印裝置(0.8-3mA/cm2),支持PVDF/NC膜轉(zhuǎn)移

化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng):16bit冷CCD相機(jī),檢測(cè)靈敏度0.5pg/band

微量分光光度計(jì):紫外/可見(jiàn)雙光束掃描,樣品體積1μL定量

條帶分析軟件:自動(dòng)背景扣除功能,支持分子量/灰度值同步分析

恒溫?fù)u床:轉(zhuǎn)速50-500rpm可調(diào),溫控范圍4-50℃

膜封閉孵育箱:濕度控制±3%,溫度均勻性±0.5℃

自動(dòng)洗膜機(jī):八通道獨(dú)立控液,流速精度±5%

預(yù)染蛋白Marker:10-250kDa十二色熒光標(biāo)記,抗轉(zhuǎn)移降解

化學(xué)發(fā)光底物自動(dòng)分配器:加樣精度±1μL,避免底物氧化

檢測(cè)流程

1、咨詢:提品資料(說(shuō)明書(shū)、規(guī)格書(shū)等)

2、確認(rèn)檢測(cè)用途及項(xiàng)目要求

3、填寫(xiě)檢測(cè)申請(qǐng)表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門(mén)取樣/檢測(cè))

5、收到樣品,安排費(fèi)用后進(jìn)行樣品檢測(cè)

6、檢測(cè)出相關(guān)數(shù)據(jù),編寫(xiě)報(bào)告草件,確認(rèn)信息是否無(wú)誤

7、確認(rèn)完畢后出具報(bào)告正式件

8、寄送報(bào)告原件

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